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不同采收期对北五味子多糖含量的影响
作者:郭志欣,秦佳梅,高巍巍,丁红梅    
作者单位:通化师范学院,吉林 通化 134002

《时珍国医国药》 2010年 第1期

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       【摘要】 
       目的比较不同采收期野生和栽培北五味子中多糖的含量。方法采用苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为对照品,在490nm波长下测定吸光度,分别测定不同采收期野生和栽培北五味子中多糖的含量。结果7月中旬野生北五味子中多糖含量最高,8月下旬栽培北五味子中多糖含量最高。结论采收期和生长环境是影响北五味子中多糖含量的重要因素。
       【关键词】  北五味子; 采收期; 多糖
        五味子,俗称山花椒,为木兰科植物五味子Fructus Schisandrae Chinensis的果实。具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心之功效[1]。目前的研究发现北五味子多糖具有保肝、抗疲劳、免疫促进、抗氧化及抗衰老和抗肿瘤的药理作用。基于北五味子的以上作用,目前对北五味子的利用不仅仅停留在入药上,而且更侧重于对北五味子的深加工。这就对北五味子的品质尤其对多糖含量有了更高的要求。越来越多的研究发现五味子多糖在提高免疫力、抗疲劳、抗肿瘤等方面都有着较好的应用前景。目前市场上出售的北五味子主要来自野生的和栽培的。野生北五味子的采集存在抢收采青现象,栽培的北五味子通常是根据收购的时间进行采收, 采收期不固定。这样多糖的积累还未达到最佳时期就被采集,造成北五味子药材品质较差。本文将通过检测北五味子不同采收期多糖含量,研究多糖积累的规律,为确定北五味子最佳的采收期提供理论指导。
       1  材料
       1.1  仪器电子天平、索氏提取器、恒温水浴锅、鼓风干燥箱、离心机、分光光度计。
       1.2  试剂无水乙醇、乙醚、葡萄糖、苯酚、浓硫酸等均为分析纯。北五味子,野生和栽培均采自通化市郊,经通化师范学院生物系植物教研室鉴定。
       2  方法与结果
       2.1  多糖的提取与精制将北五味子干燥后粉碎,用无水乙醇在索氏脂肪抽提器中回流除脂2 h,干燥备用。每组准确称取1 g样品,加水25 ml在100℃沸水浴中提取4 h[2]。过滤,滤液用0.1%的活性炭脱色[3],再向滤液中加入3倍体积95%的乙醇,于冰箱中静置过夜,待沉淀完全析出,离心收集沉淀,常规干燥,得水溶性多糖[1]。
       2.2  标准曲线的绘制准确称取标准葡萄糖10 mg于100 ml容量瓶中,加水至刻度,分别吸取0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9各以水补至1.0 ml,然后加入6%苯酚0.5 ml及浓硫酸2.5 ml,静置10 min,摇匀,室温放置20 min后,以1.0 ml水按同样显色操作为空白,于490 nm测光密度,以多糖微克数为横坐标,光密度值为纵坐标,得标准曲线(见图1)。对测得的数据进行线性回归,回归方程为:A=0.014 1 C+0.009 8,相关系数r=0.995 6。实验结果表明在1~10μg/ml范围内浓度与吸光度之间呈良好的线性关系。
       2.3  换算系数的测定取北五味子多糖10 mg,精密称定,加水溶解并定容至100 ml,精密量取1ml按标准曲线制备方法测定吸光度,利用标准曲线计算单糖浓度,然后利用公式计算换算系数f=1.19。公式为f=W×1 000/C×D,W:称取多糖的重量(mg);C:溶液中单糖的浓度(μg/ml);D:稀释因素。
       2.4  精密度实验连续测定5次同一对照品溶液的吸光度,计算RSD值,结果RSD值为1.83%。
       2.5  加样回收率测定精密称取已知含量的样品粉末5份,每份加入一定量的葡萄糖对照品,按样品测定项下操作,测得平均回收率为98.32%,RSD=1.71%。2.6  样品多糖含量的测定精密称取提取出来的北五味子多糖10 mg置100 ml容量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀,即得样品供试液。精密吸取上述样品供试液1 ml,按标准曲线方法测定吸光度,并计算出样品中的多糖的含量[4]。结果见表1~2。表1  不同采收期野生北五味子中多糖的含量(略)表2  不同采收期栽培北五味子中多糖的含量(略)
       3  讨论
        我国五味子资源丰富,分布广泛,对于其化学成分的药理作用的研究也比较深入,许多学者从五味子水提液中分离得到了多糖有效部位,并对其药理活性进行研究[5]。因此,为了充分利用植物资源,提高其价值,本实验以北五味子多糖成分为指标,考察不同采收期对多糖成分的影响。结果表明,不同采收期的北五味子多糖的含量有明显差别,以7月中旬采收的野生北五味子多糖含量最高,8月下旬采收的栽培北五味子多糖含量最高。说明采收期和生长环境对北五味子多糖含量均有重要影响。
       【参考文献】
         1]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005:44.
       
       [2]洪建跃,刘姝怿.五味子多糖制备工艺的优化研究[J].北华大学学报(自然科学版),2008,9(4):334.
       
       [3]薛 梅,周 静.五味子多糖的提取及含量测定[J].陕西中医,2003,24(3):267.
       
       [4]李 洁.不同采收期对半枝莲中多糖含量的影响[J].辽宁中医药大学学报,2008,10(6):194.
       
       [5]李小光,高 勤,翁 文,等.五味子多糖的研究概况[J].时珍国医国药,2006,17(6):931.

经典中医古籍

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